如何培養LLC1細胞(二)?
如果漂浮的死細胞多,說明細胞有很多老化的,建議每次傳代的時候,在用胰酶消化之前,用PBS將細胞漂洗一遍,胰酶消化的時間要把握好,37℃2-3min即可,及時終止反應,否則胰酶消化過度對細胞損傷較大,也會有很多死細胞出現的;吹打細胞的動作要輕柔。
體外培養的細胞,不論是元代細胞還是傳代細胞一般不包吃體內原有的細胞形態。但大體可以分為兩種基本形態:成纖維樣細胞(LLC1細胞)與上皮樣細胞(LLC1細胞)。此外還有一些可移動的游走細胞。
某些傳代細胞還可用懸浮方法培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
此培養條件比較復雜,懸浮培養的優點是能同時獲得大量細胞。
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