小鼠巨噬細胞的培養(yǎng)方法
巨噬細胞(小鼠巨噬細胞)也建有無限細胞系，大多來自小鼠，如P338D1、S774A.1、RAW264.7等，均獲惡性，培養(yǎng)中呈巨噬細胞形態(tài)和吞噬功能，易于傳代和瓶壁分離，但難以建株。培養(yǎng)(小鼠巨噬細胞)巨噬細胞可用各樣方法和各種來源來獲取細胞，以小鼠腹腔取材法*為實用，其法如下：
1、實驗前三天，向每只小鼠腹腔內注入無菌硫羥乙酸肉湯1ml（勿注入腸內）。
2、引頸殺死動物，手提鼠尾將全鼠浸入70%酒精中3～5秒。
3、置動物于解剖臺上，用針頭固定四肢，雙手持鑷撕開皮膚拉向兩側，暴露出腹膜，但勿傷及腹膜壁。
4、再用70%酒精擦洗腹膜壁后，用注射器吸10mlEagle液注入腹腔中，同時從兩側用手指揉壓腹膜壁，令液體在腹腔內充分流動。
5、用針頭輕輕挑起腹壁，使動物體微傾向一側，使腹腔中液體集于針頭下吸取入針管內。
6、小心拔出針頭，把液體注入離心管中，250g4℃離心10分鐘，去上清，加10mlEagle培養(yǎng)基。
7、計數(shù)細胞，每只小鼠可產生20～30×105細胞，其中90%為巨噬細胞。
8、為獲取3×105帖附細胞/平方厘米，需接種2.5×106/ml。
9、為純化培養(yǎng)細胞，去除其它白細胞，接種數(shù)小時后，去除培養(yǎng)液，用Eagle液沖洗1～2次后，再加新Eagle培養(yǎng)液置37℃，5%CO2溫箱中培養(yǎng)。
尊敬的客戶：
本公司還有KCL22、KB細胞、HUF細胞產品，您可以通過網頁撥打本公司的服務電話了解更多產品的詳細信息，歡迎新老客戶放心選購自己心儀產品，我們將竭誠為您服務！
